Triagem simultânea de 211 resíduos de pesticidas em frutas de information no Irã e avaliações de risco à saúde com base na simulação de Mont Carlo

Químico e reagentes

Todos os materiais foram fornecidos pela Merck Chemical substances (Darmstadt, Alemanha) e todos os reagentes foram grau de HPLC (Fisher Chemical Scientific, Reino Unido). A água ultrapura foi produzida pelo Milli-Q System (Millipore, MA, EUA). Os padrões de 211 pesticidas foram adquiridos do Dr. Ehrenstorfer (Augsburg, Alemanha), todos com pureza> 98%. A solução de estoque de pesticidas particular person foi preparada e armazenada a – 18 ° C. Alguns adsorventes como sulfato de magnésio anidro (mgso₄), cloreto de sódio (NaCl), di -hidrato de citrato de trissódio (C₆H₅N / D₃O₇.2h₂O), dessódio hidrogênio citrato sesqui -hidrato (c₆H₈N / D₂O₈) e a amina secundária primária (PSA) foram adquiridas da Agilent Co. (EUA) necessidade de extração de Quechers.

Instrumentação

O modelo de banho ultrassônico (Sonicator) Vclean 1 -16 (Vira Tejarat Bekr Co., Teerã, Irã), Modelo de Centrífuga Common 320R (Hettich, EUA), Shaker Vortex Modelo Vortex 3000 (Wiggens, China), Modelo Ph Meter CP -511 (Elemtron, Polônia), Modelo Ok.M85 (Pars Azma, Irã), O evaporador de nitrogênio (Royan Iran Co., Irã) foi usado para o processo de preparação de amostras.

Soluções padrão e procedimentos de pico

Os pesticidas têm uma variedade de estabilidades de pH, para cobrir todo o espectro de pesticidas analisados, foram preparadas múltiplas soluções padrão de trabalho contendo um ou mais pesticidas. Os volumes definidos das soluções de estoque de pesticidas necessários foram misturados para preparar esses padrões usando frascos volumétricos de classe “A” certificados de acordo com os requisitos de solubilidade e estabilidade compostos com o quantity apropriado de acetonitrila. O pico foi realizado para duas concentrações de 0,01 e 0,05 mg kg^-1. Para esse objetivo, 10 g de amostra de pasta de information foram cravadas com 75 µl e 375 µl de soluções padrão mistas para 0,01 e 0,05 mg kg^-1 respectivamente. Além disso, uma solução padrão interna (IS) de trifenilfosfato (TPP) (0,01 mg kg^-1) foi feito em acetonitrila e 75 µL foi adicionado a todas as soluções e amostras. O armazenamento padrão foi realizado a uma temperatura de – 18 ° C até a análise.

Coleta e armazenamento de amostras

90 amostras de frutas de information fresca foram coletadas de diferentes lojas e mercados locais localizados em três cidades de Kahnoj, Bam e Jiroft, na província de Kerman, entre junho e agosto de 2023. Figura 1 Representa a localização geográfica das áreas de amostragem. De acordo com o Codex recomendado métodos para amostragem de pesticidas (CAC/GL 33-1999), 1 kg de cada variedade de fruta de information (Mazafati, Piarom, Shahani, Rabbi, Zahedi, Kabkab, Kaloteh, Karoot e Qhasb) foram coletados para monitorar pesticidas. As amostras foram armazenadas em um freezer ( – 18 ° C) até a análise (cada amostra foi analisada no máximo 3 dias após a preparação).

Procedimentos de preparação e extração de amostras

Um método de quechers modificado foi utilizado para extrair pesticidas de acordo com o método BS EN 15.662: 2018 com algumas modificações. As 90 amostras de frutos de information (1 kg de cada amostra), exceto as sementes, que incluem o exocarpo, mesocarpo e endocarpo foram misturadas e homogeneizadas como particular person (o pico foi feito nesta etapa antes do processo de separação). Em seguida, 10 g de cada amostra de frutos de information foram transferidos para um tubo de centrífuga de 50 ml contendo 4,5 ml de água e 10 ml de acetonitrila. A mistura foi vórtice por 3 min. Os pesticidas foram autorizados a penetrar na pasta de information, colocando a mistura em um native frio e escuro por 1 h e impedindo qualquer possibilidade de decomposição de pesticidas na luz (dia). 4 g de sulfato de magnésio anidro, 1 g de cloreto de sódio, 1 g de di -hidrato de citrato de trissódio e 0,5 g de hidrogencitrato de dissódio sesqui -hidratados em cada tubo e agitados novamente por 3 min. Em seguida, a mistura foi centrifugada a 3000 rpm por 5 min a – 5 ° C. Imediatamente, a fase superior de acetonitrila contendo pesticidas foi separada por uma micropipeta de canal único e transferido para um tubo de centrífuga de 15 ml, que continha 150 mg de psa e 900 mg de sulfato de magnésio. A mistura foi agitada por 30 s e centrífuga por 3000 rpm por 5 min a – 5 ° C. Depois disso, 1 ml da solução de extrato foi reunido e filtrado através de um filtro de seringa PTFE de 0,22 µM e usado para análise cromatográfica de gás e líquido, conforme ilustrado na FIG. 2.

Representação esquemática do método Quechers de resíduos de pesticidas a partir de amostras de frutas de information.

Instrumentação

Os resíduos de pesticidas foram analisados ​​simultaneamente usando o sistema GC-MS-MS (7890B, Agilent, EUA) acoplado a um detector de massa quadrupolo triplo em tandem e um amostrador automático (7683b). Além disso, o sistema UHPLC -MS -MS (1200, Agilent, EUA) acoplado ao espectrômetro de massa triplo quadrupolo (6410, Agilent, EUA) com ionização por eletropulverização (ESI) também foi utilizado para análise. O desempenho analítico ideally suited foi alcançado através da definição de todas as condições resumidas em tabelas S1 e S2. Além disso, tabela S3 mostra os parâmetros GC -MS/MS e LC – MS/MS para a análise de 211 pesticidas.

Validação do método

Para considerar a validação do método proposto, os parâmetros relacionados, incluindo precisão, linearidade, precisão, recuperação, limite de quantificação (LOQ), o limite de detecção (LOD) e o efeito da matriz foram investigados de acordo com o Sante/11.312/2021.²⁴. Para avaliar a linearidade do método, as amostras em branco de fruta homogeneizadas foram atingidas com analitos alvo em 7 concentrações de 0,015, 0,060, 0,105, 0,150, 0,195, 0,240, 0,30 mg kg kg^-1.

O LOQ e LOD foram determinados de acordo com as recomendações de Sante²⁵ calculando o desvio padrão (DP) da matriz de dados pura com o menor nível aditivo de 0,01 mg kg^-1 da mistura de pesticidas, garantindo a precisão perfeita (77-119%) e a precisão ((RSD) ≤ 15%). A precisão e a recuperação do método foram obtidas por um estudo de recuperação no qual amostras em branco foram atingidas com a mistura de pesticidas nas concentrações de 0,01 e 0,05 mg kg^-1. Os dados obtidos são os resultados de seis repetições. Os materiais cravos foram então analisados ​​de acordo com o protocolo do método e os analitos alvo foram quantificados com base nas curvas de calibração da matriz resultante. Repetibilidade (n = 6) (precisão intra-dia) e reprodutibilidade (precisão entre dias) (n = 12) foram calculadas como valores de RSD a partir de medições espelhadas realizadas por um operador no mesmo dia e por dois operadores diferentes em 3 consecutivos dias.

Os efeitos da matriz (ME) são definidos pelo Codex como a influência na concentração medida ou quantidade do analito alvo devido à presença de outras impurezas na amostra. O alcance de mim determinado pela comparação da resposta de um analito em pura solução de tendência para sua resposta no extrato de amostra pode variar significativamente²⁶. Eu é calculado pela Eq. (1):

Avaliação de risco à saúde

O quociente de perigo alvo (THQ) foi obtido usando a Eq. 2 do seguinte modo²⁷:

Ingestão diária aceitável (ADI) (dia mg^-1) foi apresentado pela Reunião Conjunta sobre Resíduos de Pesticidas (JMPR) ou pela Autoridade Europeia de Segurança Alimentar para Avaliação de Riscos à Saúde.

A estimativa da ingestão diária (EDI) foi calculada usando^28Assim,29:

C é a quantidade de pesticida (mg kg^-1); IR é a taxa de ingestão de capital (kg/dia), a EF é a frequência de exposição (350 dias/ano) e o ED é a duração da exposição para adultos (70 anos) e crianças (6 anos).

O PC mede o peso corporal (as crianças pesam 15 kg enquanto os adultos pesam 70 kg) e, em medidas, a vida média (2100 dias para crianças e 10.500 dias para adultos).

O consumo per capita da information de fruta 5,7 kg/y. Portanto, a fruta da information diária seria de aproximadamente 0,015 kg/dia.

O quociente de perigo (HQ) é a razão da exposição da fonte específica de interesse para os valores de referência respeitados³⁰. A seguinte equação calculada pelo quociente whole de perigo (HQ) ou Índice de Perigo (HI)³¹:

Quando oi <1, o risco de saúde nos consumidores é aceitável, mas se o HQ e/ou o HI> 1 valor, existe um risco à saúde dos consumidores³².

Técnica de simulação de Monte Carlo (MCS)

Múltiplas incertezas podem surgir através da estimativa de avaliações de risco à saúde³³. A alta incerteza é esperada usando um cálculo de risco à saúde de valor único. Portanto, o MCS foi usado como um modelo probabilístico usado³⁴. Com base no MCS, os riscos não carcinogênicos e carcinogênicos são identificados pela Ball Crystal (versão 11.1.2.4.600 (32 bits) Oracle, Inc., EUA). Os números de reprodução para cada equação eram de pelo menos 100.000, e o padrão para o risco à saúde do consumidor period percentil 95%³⁵.