Aqui, relatamos uma reação em cascata enzimática convertendo alta concentração de formaldeído em L-threitol. A reação em cascata começa com a carboligação do formaldeído catalisado pela formolase e pela frutose-6-fosfato aldolase, gerando L-eritulose. Posteriormente, uma L-threitol desidrogenase recentemente identificada facilita a conversão de L-eritulose em L-Threitol, utilizando o NADH como uma coenzima. Três tentativas de sistemas de regeneração NADH foram investigadas para facilitar a reciclagem de NADH no sistema de reação. 405,7 mm (49,6 g/L) L-threitol foi alcançado a partir da conversão de formaldeído em um sistema de reação de um pote com sistema de reciclagem NADH auto-suficiente, que se baseia na oxidação do glicerol catalisado por glicerol desidrogenase. Além disso, o maior rendimento (89,4%; 251,3 mm) de L-threitol de formaldeído foi alcançado no sistema de reação de duas etapas de uma panela que o NADH foi reciclado eficientemente usando metanol deshidrogenase e isopropanol.