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domingo, fevereiro 23, 2025

Formação espontânea de lipossomas sem homogeneização de alta pressão


Vesículas lipossomais nanométricas (NLV) foram preparadas com sucesso usando lecitina de girassol pure sem o uso de homogeneização ou filtração de alta pressão. Após a adição de glicerol às dispersões de vesículas multilamelares de lecitina (MLVs), estas quebraram-se espontaneamente em lipossomas com diâmetros de ~120 nm. A dispersão de luz estática demonstrou que a adição de glicerol acima de 30% (p/p) induziu a transformação completa de MLVs em NLVs. A difração de raios X de pequeno ângulo e os cálculos de densidade eletrônica mostraram o inchaço das lamelas com água e o inchaço e desorganização das bicamadas após a adição de glicerol. Experimentos de compressão através de Langmuir mostraram um comportamento compressivo de duas regiões. Após adição de 62% (p/p) de glicerol, o módulo de compressão dos lipossomas diminuiu de 18,5 para 8,13 mN/m. As medições de atividade de água e RMN de pulso também mostraram uma divergência no comportamento acima de 30% (p/p) de glicerol. Os lipossomas não eram birrefringentes em água, mas tornaram-se fortemente birrefringentes em e acima de 30% de glicerol (p/p), conforme determinado por microscopia de luz polarizada (PLM), e perderam toda a birrefringência acima de 80% (p/p) de glicerol. Isto foi interpretado como a indução de birrefringência de estresse após o inchaço. Nossa hipótese é que a mistura de fosfolipídios na lecitina resulta em uma curvatura intrínseca efetiva diferente de zero para a mistura molecular, o que diminui a energia de curvatura da bicamada, permitindo uma quebra mais fácil na mistura. Em segundo lugar, a adição de glicerol diminui a interação atrativa de van der Waals entre as lamelas em uma MLV, enfraquecendo assim as paredes dos lipossomas multilamelares. Todos esses fatores resultam na decomposição espontânea de MLVs em NLVs.

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